编辑|steins来源|岛津分析中心背景摘要:紫外可见分光光度计和荧光分光光度计都经常用于样品定量。使用紫外可见分光光度计进行定量时基于朗伯比尔定律,测定的吸收值一定范围内与样品浓度成正比。另一方面,利用荧光分光光度计时,使用荧光强度。在低浓度时,荧光强度与浓度成正比,所以,可以用于定量。本次使用紫外可见分光光度计和荧光分光光度计两台仪器分别测定了罗丹明B溶液。罗丹明B是用于纤维和皮革的染色的荧光物质。关于测定结果,对两个机种的定量、检测下限值和标准曲线的线性度进行了比较,下面将进行介绍。1紫外1罗丹明B溶液的吸光度测定使用了紫外可见分光光度计UV-260Oi测定样品吸光度。测定条件如表1所示。将粉末状的罗丹明B溶解在蒸馏水中,调配~5ug/ml的标准溶液。罗丹明B的标准溶液的吸光光谱如图1所示,根据544nm的吸光度值创建的标准曲线如图2和图3所示。在图2中,用~5ug/ml的6点和空白样品(蒸馏水)创建,得到了线性度良好的标准曲线(相关系数的平方值是)。在图3所示的低浓度区域中,噪声的影响相对较大,导致线性较差。2荧光2罗丹明B溶液的荧光强度测定使用了荧光分光光度计RF-60O0测定了样品荧光强度。测定条件如表2所示。超微量分光光度计占据实验室空间体积比传统分光光度计小很多!北京元析分光光度计推荐
紫外可见分光光度计的原理:物质的吸收光谱本质上是物质中的分子和原子吸收了光中的光波能量,相应地发生了分子振动级跃迁和电子能级跃迁的结果,由于各种物质具有不同的分子原子和分子结构,所以在吸收光能量的情况也各不相同,仪器通过各种物质特有的吸光光谱的曲线,来判定被检测物质的含量,这就是紫外可见分光光度计定性和定量的基础,紫外可见分光光度计就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分,结构。红外分光光度计的原理:由光源发出的光,被分为能量相同的两束光线,其中一束通过样品,另外一束作为参考光作为参照基准。这两束光通过样品进入红外分光光度计后,被扇形镜以一定的频率调制,形成交变信号,两束光合为一束。内蒙古紫外可见分光分光光度计品牌超微量分光光度计不需要预热,可随时检测,检测时间短.
试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。每个滤光片的吸光值是相对空白滤光片测定的。这个试剂盒不仅能让用户获得测量准确性的信息,也能提供精确度的信息,包括平均值和变异系数。在测量准确性和精确度时,将空白滤光片和样品滤光片放入插槽内。将测得的输出吸光度值与允许值范围比较。在检查波长时,测定三个测试滤光片在对应波长(260nm、280nm和800nm)下的吸光度,以确定每个波长的变异系数。许多分光光度计,包括Eppendorf的所有仪器,都带有一个特殊的功能——自检。Eppendorf建议用户至少每周运行一次自检,但自动自检的频率可根据需要进行设定。自检主要检查仪器的几个部分。它通过测定现有波长的随机误差来校验检测器,通过检查大能量、随机误差、基准传感器的信号和光强度来校验光源。它还通过测定紫外光谱范围内强度峰值位置的精确度来确定波长的系统及随机误差。遵照这些建议来维护分光光度计,那么在今后的使用过程中再也不用担心测量结果有问题啦。
UV-5500(PC)型紫外可见分光光度计仪器特点和功能;双光束比例监测光学系统;仪器采用128*64位点阵式液晶显示器,每屏可显示多组数据;能直接建立标准曲线,并可用标准曲线进行相关的测试;可连续测试和存储200组数据,并可存储200条标准曲线,用户可根据编号方便调用,测试数据可断电保持;波长自动校准、自动设定、偏差自我修复;换灯免光学调试;UV-5500PC型标配元析公司的扫描软件可直接完成光度测量、定量测试、定性测试、动力学测试、多波长测试、DNA/蛋白质测试及数据图谱的处理仪器指标波长范围190-1100nm光谱带宽2nm杂散光≤;UV-5500PC型标配元析公司的扫描软件可直接完成光度测量、定量测试、定性测试、动力学测试、多波长测试、DNA/蛋白质测试及数据图谱的处理。超微量分光光度计占据实验室空间体积比传统分光光度计小很多;
分光光度计分光光度计是实验室检测核酸或者蛋白样品浓度**常用的工具之一。仪器使用频繁,但甚少见到有人维护。其实,保持分光光度计清洁、无污染是成功操作的关键。清洁仪器我们应该用蘸有中性清洁剂的软布擦拭分光光度计的表面。刺激性的清洁剂可能会损坏仪器表面。你也可以清洁比色皿本身。比色皿插槽只能用蘸有乙醇或异丙醇的无绒棉签来清洁。这可防止液体进入内部。如果你必须要用水清洁,那么可用蘸有乙醇或异丙醇的棉签来加速干燥。比色皿插槽的盖子也可以清洁,但不是泡在清洁剂中。如有必要,拆下盖子,用蘸有温和清洁剂的软布或无绒棉签来清洁。此外,平时不使用时,应盖上比色皿插槽的盖子,以免灰尘或其他污染物落入。消毒和净化如果分光光度计被微生物所污染,那么可采用下列步骤进行消毒和净化。首先,利用温和的清洁剂来清洁设备。然后,用蘸有消毒剂(通常是酒精溶液)的软布擦拭表面。如有必要,拆下并清洁比色皿插槽。检查组件维护的另一方面在于检查分光光度计的光度准确性。Eppendorf提供了一个滤光片系统(BioSpectrometerreferencefilterkit),以评估光度准确性和系统的波长误差。试剂盒包含一个空白滤光片、三个检查光度的滤光片和三个校正波长的滤光片。单色器是分光光度计的心脏部分,是把来自光源的混合光分解成单色光。青海uv分光光度计使用
任何紫外可见分光光度计,必须要有相应的光电转换系统。北京元析分光光度计推荐
一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multipliertubes,PMTs)和光敏二极管。北京元析分光光度计推荐