常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。培养平板培养基也叫平面培养基、平皿培养基。黑龙江自动搅拌培养基制备器
背景技术：培养基是供微生物、植物、动物组织和细菌生长和维持生长用的人工配置的养料，完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定，一般都是在无菌状态下储存，定量使用的，属于一种高新产业。传统的制备培养基的过程先将培养基粉末进行人工配置，搅匀，然后再装到锥形瓶里边在蒸汽灭菌器里边灭菌再使用，这需要耗费大量的人力物力，而且效率不高。目前，国外进口的培养基制备器，可以将配置、灭菌合二为一，较后恒温保持等待分装。极大地提高了效率，而且节省了人力物力，但是国外的的进口设备价格比较昂贵，因此造成了生产成本的高居不下，在用户的使用范围上造成了一定的局限性。目前国内没有公司生产该的培养基制备器，因此，完成培养基配置、灭菌一体化显得尤为重要。西藏培养基制备器报价在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。
培养基配置原则：营养物质浓度及配比合适，培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不但不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑菌或杀菌作用。另外，培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C/N）的影响较大。严格地讲，碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如，在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中，培养基碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；当培养基碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。再如，在发酵生产过程中，可以通过控制培养基中有效氮（或碳）源与迟效氮（或碳）源之间的比例来控制菌体生长与的合成协调。
培养基配置原则：在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时，常需在培养基中加入少量螯合剂，避免培养基中产生沉淀，常用的螯合剂为乙二胺四乙酸。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行灭菌，然后再混合，避免形成沉淀；高压蒸汽灭菌后，培养基pH会发生改变（一般使pH降低），可根据所培养微生物的要求，在培养基灭菌前后加以调整。在配制培养基过程中，泡沫的存在对灭菌处理极不利，因为泡沫中的空气形成隔热层，使泡沫中微生物难以被杀死。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。
在制备培养基时，通常要考虑以下因素：(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长*pH值变化很小，但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4～7.7，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值，做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变黄色，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。培养基长时间的高温灭菌会使某些不耐热的物质破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖。海南培养基制备器厂家
配制培养基的原则：根据培养目的需要选择适宜的营养物质。黑龙江自动搅拌培养基制备器
微生物检验培养基制备的要点：培养基灭菌处理：分装完成的培养基应马上灭菌。其杀毒灭菌方式主要有三种类型：高压蒸汽灭菌方式，此方法可用于大多数耐热培养基。对于小份：使用121°C十五分钟；大份：121°C三十分钟；对于含碳水化合物的中.海培养基，需113~115°C十五分钟。灭菌以避免糖分的破坏。煮沸灭菌法方式，此方法可用于含有不耐高温物质的培养基。过滤除菌方式，过滤除菌，采用无菌技术定量添加培养基。血液和可以用无菌技术抽取并加入冷却至约五十度的培养基中。当中'海培养基中含有不耐热物质时可以使用此方法。黑龙江自动搅拌培养基制备器
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