TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体，与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色，而缺血组织内脱氢酶活性下降，不能反应，故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死，解剖取材完整的脑组织，在-20℃速冻20min，便于切片。切片切成6片，每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液（PH 7.4）溶液中，用锡箔纸盖住培养皿，放入37℃温箱30min，15min后翻动脑切片，使其均匀接触到染液。当阻断血管达到120 min或更长时间时，会影响下丘脑的供血，导致自发性高热，影响实验结果。上海脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型实验外包
局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞（Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO）由于大（小）鼠脑血管解剖结构与人类相似，大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位，同时，采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu（持续）和短暂性损伤等多种状态，在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势，因此，MCAO是目前*广为接受一种药效模型。将尼龙线由大（小）鼠的颈外动脉（ECA）插入，经颈内动脉（ECA）阻断一侧MCA起始端，导致一侧（局灶性）脑缺血。术后再使用激光散斑血流仪或多普勒血流仪对造模效果进行验证和确认。南京本地脑梗MCAO模型Y迷宫这种模型有助于研究脑梗的发病机制，并寻找新的治*策略。
采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价，0分：无神经功能缺损症状；1分：出现左侧 Honer征，轻度神经功能缺损；2分：提尾对侧前肢内旋，肩内收，中度神经功能缺损；3分：向对侧转圈、向对侧倾倒，重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，部分意识丧失。鼠侧倾倒，评分为3分。 沿脑桥上界面切断，去除嗅球，称全脑重，立即放入-20℃冰箱， 20 min 后取出，由前向后做连续冠状切片（切片厚度2 mm）。将脑切片置入0.1% TTC溶液中，后放入恒温振荡器中，37℃避光染色30 min，将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h，取出脑片，相机拍照，用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。
脑梗MCAO模型关于禁食：很多动物实验都是要求在开展实验的前一天对动物进行禁食，但小编查阅文献后认为可根据实验目的灵活调整。当大鼠血糖浓度高或者低时，脑损伤程度加重、梗死面积增大、脑水肿加重、梗死后出血率增大，因此需要检测大鼠的血糖状态。必要时可在实验前12-24h禁食。然而啮齿类动物代谢率较高，一旦空腹超过6小时可能会导致动物体重减轻和肝糖原耗竭，影响动物的生理状态和手术耐受性，以及候选药物的神经保护作用。将动物放在一个有阶梯的平台上，观察动物是否能顺利爬上爬下，以评估动物的肢体运动能力和协调性。
脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中，占脑卒中总数的 60% ～ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因，但研究发现，缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。 通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法，此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助，缺血部位较恒定，能够准确控制缺血及再灌注时间，容易控制局部条件，全身影响小，是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。发现呼吸异常，用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧，防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。上海脑梗MCAO模型周期
注意缝合时不要将线栓带出，*后根据评分来判断成模性。上海脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型实验外包
动物疾病模型的标准化和规范化非常重要，因为这可以确保研究结果的可重复性和可比性，从而提高研究的科学性和可信度。首先，标准化和规范化可以确保研究中使用的动物疾病模型具有一致的特征和表现，这有助于减少实验误差和结果的不确定性。例如，如果使用不同品系的小鼠来建立同一种疾病模型，那么由于它们的基因组和表型差异，可能会导致实验结果的差异，从而影响研究的可靠性。其次，标准化和规范化可以确保研究中使用的动物疾病模型符合伦理和法律要求，从而保护动物的福利和权益。例如，对于使用动物进行研究的实验室，需要遵守相关的伦理和法律规定，包括动物福利法和实验动物管理规定等。标准化和规范化可以确保实验室符合这些规定，从而保证动物的福利和权益得到保护。除此之外，标准化和规范化可以促进研究结果的共享和交流，从而加速科学研究的进展。如果研究中使用的动物疾病模型没有标准化和规范化，那么其他研究人员可能无法重复这些实验或者比较不同实验之间的结果，从而影响科学研究的进展。综上所述，动物疾病模型的标准化和规范化对于确保研究结果的可重复性和可比性、保护动物的福利和权益以及促进科学研究的进展都非常重要。上海脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型实验外包
