疫检测对照，茴香霉素处理和PDGF处理的3T3小鼠成纤维细胞裂解液（10-0.63 ug）被转移到Immobilon8-P膜上。印迹被阻止补充有0.5％脱脂奶粉（NFDM）的Tris缓冲盐水含0.1％Tweeno 20表面活性剂（TBST），并用一级抗B-Tubulin进行探测（MAB3408）和次级HRP偶联的山羊蚂蚁（AP1 24P）在上述条件。将印迹暴露于X射线胶片一分钟。维护SNAP i.d.o 2.0系统清理去除协议每次使用时应清洁SNAP i.d.o 2.0系统。清理去除盐碱中的盐或污染物和管道，抽吸真空并通过系统冲洗散去的水。注：请勿对SNAP i.d.9 2.0系统进行高压灭菌。可以拆卸框架，并用中性清洁剂洗涤，然后用蒸馏水彻底冲洗。风干。要拆卸框架，请使用右侧的蓝色夹子调整框架的方上海益启细胞跨膜电阻仪订购方便。青浦区Merck细胞计数器Merck仪器联系电话
lon@CrescendoWesternHRP基材WBLUR0500500毫升Immobilon@ClassicoWesternHRP底材WBLUC0500500毫升Immobilon@WesternHRP基材WBKLS05零零5零零毫升Immobilon@ECLUltraWestemHRP基材WBULS05零零5零零毫升TMB，不溶61毫升用于免疫检测的Immobilon@信号增强剂WBSH05S05零零5零零毫升免疫印迹封闭剂20-20020克Re-BlotTMPlus强力抗体剥离解决方案，10倍25毫升Immobilon@Block-CH缓冲液WBAVDCH01S05零零毫升Immobilon@Block-FL缓冲液WBAVDFL01500毫升Immobilon@BlockMerckWB实验加速器Merck仪器报价益启生物是默克细胞计数器的代理商。
上，气体1.准备1-20x10cells/mL的细菌细胞悬液。这生产线实现了大气控制浓度可能需要优化，具体取决于细胞的类型和所需的陷印密度。流特性2.从池出口孔6和流出口孔7吸出溶液。1-5井的流动特性如图6所示。3.从细胞入口孔8吸出溶液，用移液管吸取50uL细胞流出井眼的流速与压力的函数关系。如果大于一个悬浮到该孔中，将50uLPB吸移到细胞出口孔6中。通道加压，将流率乘以确保用液体覆盖孔底部的孔加压通道得出总流量。4按照40cellASICONIK2微流体系统振荡器指南。5.打开CellASICONIX2Sof软件，选择“新建”之一35实验选项，然后在下拉列表中找到BO4A板。在“手动模式”选项卡（图7）上，单击“运行”单元加载顺序按钮。建议的压力和流动时间第8组的压力为138kPal
6厘米（1.4英寸）迷你吸墨纸架12.7厘米（5.01英寸）x 9.1厘米（3.6英寸J）带盖Midi框架（长x宽x高）19.7厘米（7.75英寸J）x 14.7厘米（5.8英寸）x 3.6厘米（1.4英寸）Midi吸墨纸架17.8厘米（7.0英寸）x 10.2厘米（4.0英寸）蚂蚁停留（长x宽x高）6.4厘米（2.5英寸）x 5.8厘米（2.3英寸）x 1.9厘米（0.75英寸）建筑材料系统基础和顶部丙烯腈丁二烯苯乙烯（ABS）垫片sllcone管道西尔科内油管fl聚丙烯或乙缩醛与乙烯丙烯二烯单体（EPDM）或Buna-N密封镜框顶部和底部ABS锁存器ABS垫片sllcone阀门三元乙丙橡胶盖聚苯乙烯吸笔座膜层具有高抗冲聚苯乙烯（HIPS）的PVDF支撑层聚丙烯与帕塔帕配件滚筒乙缩醛和不锈上海益启生物样本制备仪订购方便。
项卡（图8）创建和启动自定义协议。要手动控制流量，使用“手动模式”标签选择所需的井，压力，和温度（如果使用加热歧管）。有关自动化协议或每次融合的手册，请参阅CellASICO《ONIX2微流体系统用户指南》。注意：对于需要快速交换溶液的实验，请执行以下操作可以应用以下技术：高压（55.2kPa[8psi）下的流量对于初始过渡，然后将流量减小到标准压力长期暴露于6.9-13.8kPa（1-2psi）。 软件操作下图显示了使用ellAsICEONX2软件进行实验的两种模式，请参阅CllASICEONIX2MicrofuidieSystem用户有关软件功能的详细信息的指南。图7.手动模式降低了ONIX2系统的迭代操作。可以手动设置操作参数，此模式a5o提供了选项运行简短的自动印版设置序列，这些序列上海益启生物Merck仪器订购方便。普陀区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器联系电话
益启生物提供专业的细胞计数器。青浦区Merck细胞计数器Merck仪器联系电话
中移出并在恒定的温度下孵育颤抖。如果需要过度保温，建议冷藏。虽然表面上的污点支架可能看起来部分干燥，印迹不会变干，因为溶液包含在框架中。注意：如果长时间处理多个印迹，则可以堆叠印迹固定框架减少工作空间。可选：如果要回收一抗，请先将抗体回收盘放入底座，然后再继续执行步骤4。4.延长孵育时间后，将框架放回底座上，卸下盖子，然后按照步骤8进行操作。通用议定书第12条。注意：SNAP i.d不需要延长二抗的孵育时间。 2.0系统。建议使用5倍浓度的二抗，持续10分钟。抗体回收1.执行《通用议定书》的步骤1至5，但将真空时间增加到2分钟，以确保所有的封闭溶液都已从框架的凹槽和通道中移除。2.从底座上取下印迹固定框架，并用一根刷子擦拭框架底部的所有残留液体。纸巾。3.将抗体收集盘放入底座，确保抗体上的定青浦区Merck细胞计数器Merck仪器联系电话
