芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测:1)微量样本即可检测;微量样本、微量试剂检测:流道高度只有几十微米,是原来微孔板高度的几十分之一,可有效节省样本量、试剂量;常规检测比较低只需要10ul样本即可进行完整检测。2)单个样本可以同时进行多指标的检测多重指标检测:单个样本,同时进行2-4个指标检测,可定制更多指标;芯片单孔同时检测2个指标芯片单孔同时检测4个指标3)灵活多通道检测:可以手动完成,主要在芯片上进行,对仪器不依赖(只需要移液枪和现成的荧光显微镜,即可实现检测),更小单元可做4-8个样本检测;初始的尝试成本极低(活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验);相比普通ELISA试剂盒,更少96孔板价格2-4千元,每个检测孔20-40元;4)数字化的检测方式和检测结果;检测反应基底为阵列化、单分散排列的磁珠,可使用荧光显微镜进行可视化的免疫检测,原来的ELISA信号,转化成0或1,每个磁珠是否参与反应,反应效率如何。 4)数字化高敏ELISA芯片,微量样本实现多重快速检测!芯弃疾-勃望初芯数字ELISA准确宽
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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标
进口数字ELISA检测芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,微量检测,使用微量样本就能测试;
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。
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我们已经开发了两种临床相关蛋白的检测方法——前列腺特异性抗原(PSA)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),以确定高酶标记物单体提供的灵敏度转化为高灵敏度的检测方法血液中的蛋白质。两种蛋白质的数字ELISA如图1所示。开发这些试验的关键参数是:珠子浓度和两种标记试剂(检测试剂和酶偶联物)的浓度。珠子浓度的选择取决于几个相互竞争的因素。首先,足够的珠子必须在场以从热力学和动力学中捕获大部分目标分析物从热力学角度看,100μL中有20万个珠子,每个珠子大约有8万个与之结合的抗体25相当于约0.3nM的抗体浓度,在该浓度下,抗体-蛋白平衡导致高捕获效率(>70%)(D.M.R.,E.P.F.,D.C.D.,未发表工作)。 芯弃疾JX-8B数字ELISA, 极速检测,快15min能完成 的ELISA检测!
芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级!
阵列芯片原理:从15µLof基质中的500,000个珠子开始。结果表明,阵列图像的定量分析大约一半的孔在珠子沉降几分钟后被占据。对于SimoaHD-1分析仪,沉降时间减少到90秒,分布在三个仪器处理周期之间。随着珠子重新沉降到阵列中,仪器对其他操作(密封和成像)进行索引,这些操作已经加载到阵列上。通常,会检测25,000-50,000个珠子。由于Simoa中的测量单位(AEB)是一个比率,一定珠装载量的差异不影响数据质量或在大多的范围内保持精度,前提是存在足够的珠子数量以保持在泊松噪声水平之上。22数据质量会受到影响,当泊松噪声主导测量误差时。这发生在与背景相关的正井数量降至约50个珠子以下时,此时泊松噪声明显影响测量的变异系数(CV)。
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芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,理论可达飞克级;芯弃疾-勃望初芯数字ELISA准确宽
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数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 芯弃疾-勃望初芯数字ELISA准确宽