微量分光光度计是一种用于测量生物样品（如核酸、蛋白质、细胞悬液等）吸光度的精密仪器，因其样品用量少（通常只需 1-2 μL）、操作简便、检测快速等特点，广泛应用于分子生物学、生物化学、医学检验、药物研发等领域。以下是其**功能、原理、应用场景及优势的详细介绍：**功能吸光度（OD 值）测量基于 Lambert-Beer 定律，通过检测特定波长下样品对光的吸收程度，定量分析样品浓度。常见检测波长：核酸：260 nm（定量）、280 nm（评估纯度，A260/A280 比值）、230 nm（评估盐离子 / 有机物污染，A260/A230 比值）。蛋白质：280 nm（定量，基于酪氨酸、色氨酸吸收）、205 nm（非特异性定量，适用于不含核酸的样品）。其他：如细胞密度（600 nm）、染料 / 药物吸光度等。紫外光谱中吸收峰的位置、强度和形状包含丰富的分子结构信息，可用于研究分子间的相互作用。国产微量分光光度计直销价
纯度评估的关键波长：280nm和230nm核酸样品的纯度需通过260nm与其他波长的吸光度比值判断，**是排除蛋白质、有机溶剂等杂质的干扰：1.280nm：排除蛋白质污染蛋白质中的芳香族氨基酸（酪氨酸、色氨酸）在280nm有吸收峰，因此：比值A260/A280用于评估蛋白质污染程度：纯双链DNA的理想比值为1.8±0.1；纯RNA的理想比值为2.0±0.1；若比值低于标准（如<1.6），说明样品可能混有蛋白质（需考虑是否因苯酚/氯仿残留导致，二者也会影响280nm吸光度）。2.230nm：排除盐、有机溶剂或杂质污染盐（如EDTA、NaCl）、有机溶剂（如苯酚、乙醇）、碳水化合物等杂质在230nm有较强吸收，因此：比值A260/A230用于评估这类杂质的污染：理想比值应**≥2.0**（部分标准为1.8-2.2）；若比值过低（如<1.5），说明样品可能残留盐、酚或多糖，会干扰定量准确性（如高盐会导致A260假性升高）。国产微量分光光度计直销价食品检测：检测食品中的营养成分、添加剂、污染物等，确保食品安全。
微量分光光度计的操作流程因检测目标（如核酸、蛋白质、细胞悬液等）略有差异，但**步骤一致。操作前准备仪器与耗材检查确认仪器电源线、数据线连接正常，检测探头无划痕、污渍（若有污染，用无绒纸巾蘸蒸馏水轻轻擦拭后晾干）。准备耗材：样品（已混匀，无沉淀 / 气泡）、相应的缓冲液（如 TE 缓冲液、RNase-free 水，用于空白校准）、无绒清洁纸巾、移液器（1-10μL，确保精细）。样品预处理充分混匀样品：核酸溶液可能因静置出现浓度不均，需轻轻涡旋或吹打混匀（避免剧烈振荡导致 DNA 断裂）。评估浓度范围：若预计浓度过高（如 > 1000ng/μL），需用缓冲液稀释（稀释倍数需记录，**终浓度 = 检测值 × 稀释倍数），避免超出仪器线性检测范围（通常 0.2-1500ng/μL）。去除杂质：若样品含颗粒、纤维或气泡，需离心（如 12000rpm×1min）后取上清，或用 0.22μm 滤膜过滤，否则会干扰吸光度检测。
常规核酸浓度检测：包括dsDNA、ssDNA、RNA等多种核酸样本的检测。无需稀释样品，自动计算并显示260nm和280nm吸光度、比值以及样品浓度。蛋白质检测：检测普通纯化后蛋白的浓度，自动调整光程，无需稀释样品。检测范围通常为0.05-100mg/ul。全光谱扫描：进行200-850nm全波长扫描，显示吸收曲线。适用于细胞和微生物培养检测物以及检测荧光染料标记蛋白的吸光度。环境监测：用于监测水体中的溶解氧、重金属、有机污染物等物质的浓度，评估水体的污染程度和生态状况。药物分析：可用于分析药物的纯度、含量以及药物与生物分子之间的相互作用，为药物的质量控制提供有力支持。不同的荧光物质具有不同的激发和发射光谱，通过选择合适的激发和发射波长，可对特定的荧光物质进行性检测。
微量分光光度计的原理主要基于物质对光的吸收特性以及朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律。物质具有吸收特定波长的光线的特性。当光线通过物质时，部分光线会被物质吸收，而剩余的光线则会透过物质。这种吸收现象是物质与光相互作用的结果，与物质的化学组成和结构密切相关。朗伯-比尔定律是描述物质对光吸收程度与物质浓度之间关系的定律。其数学表达式为：A=K×C×L其中：A表示吸光度，是物质吸收光线的量的度量。K为吸（消）光系数，是物质的固有属性，与物质的种类和波长有关。C为溶液的浓度，即待测物质在溶液中的含量。L为液层厚度，即光线通过溶液的厚度。根据朗伯-比尔定律，当入射光一定时，溶液的吸光度A与溶液的浓度C及液层厚度L成正比。这意味着，通过测量溶液的吸光度A，可以推算出溶液的浓度C。通过标记特定的荧光探针，可以研究蛋白质的结构和功能、核酸的杂交与定量分析等。南京质量微量分光光度计经销商
将待测样品制备成适合检测的形式，如溶液、薄膜等。对于生物样品，可能需要进行提取、纯化和标记处理步骤。国产微量分光光度计直销价
操作全波长微量分光光度计需要注意以下事项：开机预热：按照仪器说明书正确开机，开机后让仪器预热一段时间，一般为 15 - 30 分钟，以确保仪器的稳定性和准确性。校准：使用标准物质对仪器进行校准，如使用已知浓度的标准溶液进行吸光度校准。定期进行校准，以保证仪器的测量精度。测量：将样品小心地放置在测量位置，确保样品与测量光路垂直，避免样品倾斜或晃动。选择合适的测量波长和测量模式，根据样品的性质和测量目的进行设置。对于微量样品，应使用微量比色皿的样品架，确保样品准确测量。测量过程中，避免触碰仪器或样品，以免影响测量结果。数据记录：准确记录测量结果，包括样品名称、测量波长、吸光度值等信息。如果需要，可以将测量结果保存或导出，以便后续分析和处理。国产微量分光光度计直销价
