创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液,将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。 POCT 芯片搭配小型化设备,即时检测 hs-cTnT 等指标,为急诊救治提供快速数据支持。芯弃疾数字ELISA特点
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品;应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
参考原理:通过量化异常水平的生物标志物来检测新生疾病过程是诊断和治干预的关键,以在出现继发性临床症状之前进行干预。蛋白质和核酸生物标志物的发现和验证已成为生物制药研究、靶向临床研究设计以及早期疾病诊断追求的主要驱动力。1–4由于蛋白质生物标志物提供了比核酸更多的下游信息内容,因此它们可能作为临床决策工具具有比较大的潜力。5据估计,人类蛋白质组来源于超过20,000个基因,且循环中有超过4000种分泌蛋白。6,7这些分泌蛋白中不到十分之一(375种)可以通过蛋白质测定技术可靠地测量。6在这些可测量的蛋白质中,几乎有一半(171种)已由美国食品药品监督管理局(FDA)批准的诊断测试,8个指出了蛋白质生物标志物对人类健康的重要性。 科研用数字ELISA芯片抗体筛选芯片高效筛选抗体配对,5μl 样本即可测试多种组合,缩短研发周期。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
根据目标蛋白的抗体制备了功能化的微球生产商说明。含有目标蛋白的100-μL测试溶液与200,000个磁珠悬浮液孵育2小时至23°C。然后将磁珠分离并用PBS和0.1%Tween-20洗涤三次。磁珠重新悬浮后与含有检测抗体(通常约为1nM)的溶液孵育45分钟。在23°C下最小值。然后将珠子分别用PBS和0.1%洗涤三次。Tween-20。将珠子与含有SβG(1–50pM)的溶液在23°C孵育30分钟,然后分离并在PBSand0.1%Tween-20中洗涤六次。随后将珠子重悬于10μLofPBS中,并加载到飞升液位阵列中。整个实验的总时间约为~6小时。
芯弃疾JX-8B数字ELISA
产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:
1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签
2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 全自动图像分析软件通过四参数拟合,自动计算浓度值,相关系数达 0.999 以上。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。数字 ELISA 芯片采用高透光基底与表面涂层,减少非特异性吸附,提升磁珠捕获效率。IVD数字ELISA优势
5)数字化高敏ELISA芯片试剂盒,微量样本可同时测2-4个指标;芯弃疾数字ELISA特点
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
为了证明检测极低浓度的可能诊断价值使用数字ELISA检测血液中的蛋白质,对接受治理性前列腺切除术(RP)的患者血清样本中的PSA进行了测量。PSA是前列腺病的血清生物标志物病症既用作筛查工具,也用于监测住院患者的复发接受治理性前列腺切除术28。治理性前列腺切除术后,绝大多数PSA被消除,水平低于标准商用检测方法的检测限(3pM或0.1ng/mL)。定期监测这些患者的PSA恢复情况可以检测前列腺病的复发,但术后几年内生化复发可能不会被发现。 芯弃疾数字ELISA特点