在使用微量分光光度计检测核酸（DNA/RNA）时，波长的选择需结合核酸的固有光学特性、纯度评估需求及干扰因素排除，**目标是精细定量核酸浓度并判断样品纯度。核酸定量的**波长：260nm核酸（DNA和RNA）的嘌呤和嘧啶环结构在260nm紫外光下有**强吸收峰，这是定量的关键依据：原理：根据朗伯-比尔定律，吸光度（A260）与核酸浓度成正比，仪器通过预设的吸光系数（如双链DNA的吸光系数为50μg/(mL・cm)）计算浓度。适用场景：所有核酸的浓度定量（包括dsDNA、ssDNA、RNA），是必须检测的基础波长。体积小，易于操作：设备本身体积小，操作简便，有些型号还配备了触摸屏，便于用户操作和数据输出。光程可选微量分光光度计功能
样本制备：避免气泡：气泡会导致光散射误差，需用移液器轻柔滴加样本至检测探头。杂质过滤：悬浊液（如细胞裂解液）需离心（12000rpm×5min）或 0.22μm 滤膜过滤，减少颗粒干扰。仪器校准：每次检测前用超纯水（或空白缓冲液）进行基线校准，消除背景吸光度。定期用标准品（如 10mg/mL 牛血清白蛋白）验证仪器准确性。波长选择策略：未知样本优先全波长扫描，确定特征吸收峰后再定点定量。避免选择吸光度过高（A>2.0）或过低（A<0.1）的波长，以防超出线性范围。光程可选微量分光光度计功能可用于判断提取的 DNA 或 RNA 的产量，为后续实验如基因克隆、PCR 等提供准确的起始浓度信息。
全波长微量分光光度计的优势在于其宽达190-850nm的连续光谱扫描能力。相较于固定波长或双波长仪器，此功能允许研究人员一次性获取样品在整个紫外-可见光区的完整吸收或透射光谱图。这不仅能够用于常规的核酸、蛋白定量（通过260nm或280nm处的特征吸收峰），更能通过光谱形状、峰值位置和肩峰等信息，深入分析样品的化学组成与纯度。例如，它可以有效识别样品中是否残留苯酚、胍盐等常见污染物（其在230nm附近有强吸收），评估蛋白样品中是否含有核酸干扰，或对未知化合物进行初步的鉴定。这种“全景式”的光学特性解析，为生命科学研究、化工合成及材料科学提供了远超简单定量之外的多维度信息，是实验室进行高质量样品质量控制与深入表征的基石。
纯度评估的关键波长：280nm和230nm核酸样品的纯度需通过260nm与其他波长的吸光度比值判断，**是排除蛋白质、有机溶剂等杂质的干扰：1.280nm：排除蛋白质污染蛋白质中的芳香族氨基酸（酪氨酸、色氨酸）在280nm有吸收峰，因此：比值A260/A280用于评估蛋白质污染程度：纯双链DNA的理想比值为1.8±0.1；纯RNA的理想比值为2.0±0.1；若比值低于标准（如<1.6），说明样品可能混有蛋白质（需考虑是否因苯酚/氯仿残留导致，二者也会影响280nm吸光度）。2.230nm：排除盐、有机溶剂或杂质污染盐（如EDTA、NaCl）、有机溶剂（如苯酚、乙醇）、碳水化合物等杂质在230nm有较强吸收，因此：比值A260/A230用于评估这类杂质的污染：理想比值应**≥2.0**（部分标准为1.8-2.2）；若比值过低（如<1.5），说明样品可能残留盐、酚或多糖，会干扰定量准确性（如高盐会导致A260假性升高）。将待测样品制备成适合检测的形式，如溶液、薄膜等。对于生物样品，可能需要进行提取、纯化和标记处理步骤。
微量分光光度计的操作流程因检测目标（如核酸、蛋白质、细胞悬液等）略有差异，但**步骤一致。操作前准备仪器与耗材检查确认仪器电源线、数据线连接正常，检测探头无划痕、污渍（若有污染，用无绒纸巾蘸蒸馏水轻轻擦拭后晾干）。准备耗材：样品（已混匀，无沉淀 / 气泡）、相应的缓冲液（如 TE 缓冲液、RNase-free 水，用于空白校准）、无绒清洁纸巾、移液器（1-10μL，确保精细）。样品预处理充分混匀样品：核酸溶液可能因静置出现浓度不均，需轻轻涡旋或吹打混匀（避免剧烈振荡导致 DNA 断裂）。评估浓度范围：若预计浓度过高（如 > 1000ng/μL），需用缓冲液稀释（稀释倍数需记录，**终浓度 = 检测值 × 稀释倍数），避免超出仪器线性检测范围（通常 0.2-1500ng/μL）。去除杂质：若样品含颗粒、纤维或气泡，需离心（如 12000rpm×1min）后取上清，或用 0.22μm 滤膜过滤，否则会干扰吸光度检测。微量分光光度计通常简称为微光光度计，或在某些特定上下文中直接称为分光光度计。光程可选微量分光光度计功能
能够检测到极低浓度的荧光物质，通常可以达到微克甚至纳克级别，适用于微量样品的检测。光程可选微量分光光度计功能
作物基因改良检测转基因植物 DNA/RNA 的浓度与纯度，辅助基因编辑（如农杆菌转化后的样品质控）。分析种子中贮藏蛋白（如大豆球蛋白）或次生代谢物（如类黄酮）的含量。微生物工程定量微生物质粒 DNA 浓度，优化转化效率；监测发酵液中菌体密度或代谢产物（如乳酸、乙醇）的吸光度变化。教育与教学基础实验教学：用于演示 Lambert-Beer 定律、溶液稀释计算、生物分子紫外吸收特性等原理。学生科研项目：支持本科生或研究生在分子克隆、蛋白纯化等实验中快速定量样品，降低珍贵试剂消耗。光程可选微量分光光度计功能
