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如何选择抗体？
正确选择实验所需抗体可以提高实验成功率，达到事半功倍的效果！
请根据以下注意事项选择您的抗体
确定您研究所需的比较好应用方法
并非所有抗体均可用于每种实验方法。
确定您是在进行定性或定量实验
检查供应商说明书或网站，查看抗体是否适合特定的应用
方法，如WB、ELISA等。
检测样本类型
您的组织或细胞是否表达特殊蛋白？
您是否在尝试检测潜在的或活化的蛋白？ 采购科研抗体去哪家比较专业？静安区Calbiochem抗体抗体哪家优惠
例如，磷酸特异性抗体可能*与活化的磷酸化蛋白发生反应。如果您的蛋白定位在胞内，则必须对细胞进行裂解。流式细胞实验可能要选择识别细胞表面分子的抗体。如果您的蛋白有三级结构，且掩盖了抗原表位，则必须对样本进行变性，因为有些抗体无法识别自然状态的蛋白。一些抗体*在冷冻或非固定组织中起效，而有些抗体*对经抗原修复后的石蜡切片起效。
目标蛋白的物种来源
比较好选择明确标有目标蛋白种属的抗体。参考抗体说明书或网站信息。 松江区Upstate抗体抗体销售上海买Abcam抗体哪家靠谱？
在保存抗体时请注意以下几点：
为保持比较大反应性，应按照厂家说明书保存试剂（如，当指定保存温度为2-8℃时，应避免将抗体置于室温下）。保存抗体的经验法则是将其置于非无霜冰箱/制冷机内的严格密封容器中，远离组织固定剂和交联试剂。除非加入稳定蛋白，如BSA（1% w/v），否则抗体不得
在工作液中长期保存。避免长期保存稀释的抗体。保存时遇到的主要问题是细菌或***污染。
如果抗体保存在2-8℃超过2-3天，建议进行过滤除菌和/或加入抑菌剂/防腐剂，如0.05%叠氮化钠或0.1%硫柳汞。
Troubleshooting
问题
微珠计数不足
本底过高
微珠不在制定的区域内或圈门中
整个微孔板的信号与本底相同
阳性对照的信号任样品信号过高或饱和
样品信号过低
样品和/或标准品CV值较大
微孔板洗板机吸液高度设置过低微珠混合物配制不当
样品颗粒物或粘度引起干扰
没有正确调整探针高度
本底孔受污染
洗涤不充分
Luminex*器没有正确校准或近期没有校准
没有正确词整门设置
微珠区域设置错误所用样品类型不正确*器没有洗涤或primed
做珠暴露于光下检测不正确或检测不到未加入抗体 益启生物公司带您了解抗体详情。
· 间接检测法
在间接检测法中，用纯化抗体进行解育和目标抗原结合，随后采用荧光标记二抗，形成一抗-焚光二抗复合物，从而实现对目标抗原的检测。·生物素化检测法
第三种方法即生物素化检测法;亲和素是细菌源蛋白，由于它们与生物素的天然亲和力，故如此命名。生物素-镇需亲和素复合物有时叫做molecular velcro"，因其作为一种结合两种分子的研究工具已***用于免疫检测、蛋白组学、亲和纯化以及核酸-蛋白相互作用的分析中。市场上有多种生物素化一抗或二抗可供选择;通过随后对荧光基团结合链霉亲和素的解育进行流式细胞检测。可能会实现信号放大，因为生物素具有四个链霉亲和素结合位点，导致荧光信号可能增加四倍。 上海标签抗体哪家靠谱？组蛋白抗体抗体哪家优惠
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无信号 在检测之前，转印膜在贮藏过程中发
生蛋白降解
二抗选择错误
曝光时间太短
抗原上样量不足
抗原可能被破坏
检测系统
一抗的亲和力较低
化学发光底物已丧失活性。
已从膜上剥离抗体并再次杂交。
处理方法 使用新转的膜进行实验。
检查是否使用适当的二抗。
增加曝光时间。
在凝胶上载入更多的抗原，或在载入之前使用超滤管浓缩样品，
或使用免疫沉淀，以增加凝胶中的目标蛋白量。
检查确保电泳处理未破坏抗原性。
增加（和优化）一抗的浓度和培养时间、温度。 静安区Calbiochem抗体抗体哪家优惠
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