高效液相色谱的历史
1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)***提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography 来描述他的彩色试验。
1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。
1952年,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。
1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。
1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。
1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。
1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类基因组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。
不论是单独使用还是与***的质谱仪联用,该系统都表现出更高水平的性能、生产率和易用性。湖南专业液相色谱系统供应商
液相色谱理论
发展简况
液相色谱法开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱法,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱法的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。
它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀,小颗粒具有高柱效,但会引起高阻力,需用高压输送流动相,故又称高压液相色谱法(High Pressure Liquid Chromatography,HPLC)。又因分析速度快而称为高速液相色谱法(High Speed Liquid Chromatography,HSLP)。也称现代液相色谱。
山西Vanquish液相色谱系统采购增强定性、定量样品信息。液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
分配色谱法
这种色谱的流动相和固定相都是液体,样品分子在两个液相之间很快达到平衡分配,利用各组分在两相中分配系数的差异进行分离,类似于萃取过程。
一般常用的固定液有β,β'-氧二丙腈(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、三甲撑乙二醇(TMG)和角鲨烷(SQ)。采用与气相色谱(GC)同样的方法,将固定液涂渍在多孔的载体表面,但在使用中固定液易流失。目前,应用较多的是键合固定相。在这种固体相中,固定液不是涂在载体表面,而是通过化学反应在纯硅胶颗粒表面键合上某种有机基团。
例如,利用氯代十八烷基硅烷与硅胶表面的羟基(-OH)之间的反应就可以形成一烷基化表面。这种固定液的优点是不易被流动相剥蚀。在分配色谱法中,流动相可为纯溶剂,也可以采用混合溶剂进行梯度淋洗,其极性应与固定液差别大一些,以避免两者之间相溶。通常可分为正相分配和反相分配。
液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
离子交换色谱
离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换,由于各组分离子的交换能力不同,从而达到色谱的分离。
离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术,已***用于氨基酸、蛋白质的分析,也适合于某些无机离子(NO3-、SO42-、Cl-等无机阴离子和Na+、Ca2+、Mg2+、K+等无机阳离子)的分离和分析,具有十分重要的作用。
通过4个可编程的狭缝宽度(从1nm至8nm),调整灵敏度、线性和光谱分辨率,使其满足特定应用的要求。
双 LC 的 Vanquish Duo 系统更多细节
Vanquish Duo 系统可采用多种分析检测器,包括质谱(MS)、二极管阵列检测(DAD)、电雾式检(CAD)、可变波长检测(VWD)和荧光检测(FLD)。
更高的样品容量
高样品容量为标准配置(四个板,竞品均为两个板)。通过可以选配的 Thermo Scientific™ Vanquish™ Charger 模块可以进一步增加样品的容量。
准确的流量控制帮助提高数据置信度
采用双泵通过三元溶剂梯度配比输送流量,两**全**的设备安装在同一室内。
这款适合串联 LC 或 LC-MS 工作流程的 Vanquish Duo 可增加实验室样品和投资回报。液相色谱系统厂家报价
使用***法规依从的 Chromeleon CDS,可从单一用户界面控制两个**的梯度流路。湖南专业液相色谱系统供应商
高效液相色谱分离原理
离子对
(Ion Pair Chromatography)
离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中,使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物,从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示:X水相Y-水相 === X Y-有机相
式中:X 水相--流动相中待分离的有机离子(也可是阳离子);Y-水相--流动相中带相反电荷的离子对(如氢氧化四丁基铵、氢氧化十六烷基三甲铵等);X Y---形成的离子对化合物。
当达平衡时:
KXY = [X Y-]有机相/[ X ]水相[Y-]水相
根据定义,分配系数为:
DX= [X Y-]有机相/[ X ]水相= KXY [Y-]水相
[讨论:DX与保留值的关系]
离子对色谱法(特别是反相)解决了以往难以分离的混合物的分离问题,诸如酸、碱和离子、非离子混合物,特别是一些生化试样如核酸、核苷、生物碱以及药物等分离。
湖南专业液相色谱系统供应商
串联LC或LC-MS应用提析通量VanquishDuo系统串联LC或LC-MS的VanquishDu...
【详情】高效液相色谱的历史1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)提出“色谱法”(Chromatogr...
【详情】高效液相色谱相关术语色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间...
【详情】赛默飞高效液相色谱业务副总裁兼总经理FraserMcLeod表示:“在整个生物制药的流程中,从药物研...
【详情】高效液相色谱进样装置⑴注射器进样装置:进样所用微量注射器及进样方式与GC法一样。进样压力150×10...
【详情】ThermoScientificVanquishDuoUHPLC系统VanquishDuoUHPLC...
【详情】赛默飞Vanquish超高效液相色谱系统了色谱领域又一次变革,同时谱写了UHPLC的新篇章,在Pit...
【详情】液相色谱类型液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法...
【详情】获得准确性、精密度和灵敏度的新基准。ThermoScientificVanquish™Flex二元U...
【详情】高效液相色谱综述HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,应用十分。其仪器...
【详情】ThermoScientificVanquishDuoUHPLC系统VanquishDuoUHPLC...
【详情】双LC的VanquishDuo系统的更多细节VanquishDuo系统可采用多种分析检测器,包括质谱...
【详情】