高效液相色谱的历史
1903年俄国植物化学家茨维特(Tswett)***提出“色谱法”(Chromatography)和“色谱图”(Chromatogram)的概念。茨维特使用色谱法 chromatography 来描述他的彩色试验。
1930年以后,相继出现了纸色谱、离子交换色谱和薄层色谱等液相色谱技术。
1952年,英国学者Martin和Synge 基于他们在分配色谱方面的研究工作,提出了关于气-液分配色谱的比较完整的理论和方法,把色谱技术向前推进了一大步,这是气相色谱在此后的十多年间发展十分迅速的原因。
1958年,基于Moore和Stein的工作,离子交换色谱的仪器化导致了氨基酸分析仪的出现,这是近代液相色谱的一个重要尝试,但分离效率尚不理想。
1960年中后期,气相色谱理论和实践发展,以及机械、光学、电子等技术上的进步,液相色谱又开始活跃。到60年代末期把高压泵和化学键合固定相用于液相色谱就出现了HPLC。
1970年中期以后,微处理机技术用于液相色谱,进一步提高了仪器的自动化水平和分析精度。
1990年以后,生物工程和生命科学在国际和国内的迅速发展,为高效液相色谱技术提出了更多、更新的分离、纯化、制备的课题,如人类基因组计划,蛋白质组学有HPLC作预分离等。
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液相色谱类型
液相色谱按其分离机理,可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法
凝胶色谱法
目前,凝胶色谱法既适用于水溶液的体系,又适用于有机溶剂的体系。当所用的洗脱剂为水溶液时,称为凝胶过滤色谱,凝胶过滤色谱在生物界的应用比较多;采用有机溶剂为洗脱剂时,称为凝胶渗透色谱,凝胶渗透色谱在高分子领域应用比较多。
四种不同类型的液相色谱,可以依据样品性质的不同,选择不同的方法,灵活应用。
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Thermo Scientific™ Vanquish™ Duo UHPLC 系统,将两套梯度流路整合在一个超高效液相系统里,并能实现三种不同工作流程(双LC,串联液相或LCMS质谱前端,以及反梯度)这些工作流程可通过节约时间、减少每份样品的成本、在不额外增加工作台面的情况下提高仪器设备容量并更加高效地利用资源,以提升生产率。Vanquish Duo UHPLC 系统可在不影响性能、稳定性或易用性的情况下扩大 Vanquish 平台的优势。
串联 LC 或 LC-MS应用提**析通量 Vanquish Duo系统
很大程度地 提高了质谱仪的利用率
梯度分离通常用于 LC 或 LC-MS。色谱柱清洗和重新平衡耗费时间长从而降低了总体样品通量。串联 LC或 LC-MS 的 Vanquish Duo 系统通过以下方式消除了这些限制并提高了分析效率:
• 在不更改验证方法的情况下增加了样品通量
• 通过尽可能地提高仪器利用率增加了投资回报
• 通过延伸的色谱柱清洗方法减少了色谱柱残留量,同时不影响通量
• 根据原始梯度方法自动进行串联方法转换,简化了双梯度方法设置
通过4个可编程的狭缝宽度(从1nm至8nm),调整灵敏度、线性和光谱分辨率,使其满足特定应用的要求。
获得准确性、精密度和灵敏度的新基准。Thermo Scientific Vanquish™ Flex 二元 UHPLC 系统与**的二元高压泵和**的二元溶剂混合具有生物相容性。该超高效液相色谱系统共享所有 Vanquish 指标,例如专注于正常运行时间、耐用性和可靠性的设计。多种检测选项为您提供您所需要的性能。Thermo Scientific™ Viper™ 整个系统采用手拧装配连接,便于安装。该系统尤其适用于高通量分析,可与质谱仪(MS)无缝联用。
将先进的四元溶剂混合技术与 Thermo Scientific™ Vanquish™ Quaternary Flex 系统相结合,**终获得生物兼容 UHPLC 系统。作为 Vanquish UHPLC 产品系列中的一员,Vanquish Quaternary Flex 系统可采用先进的四元低压泵来设定精确度和灵敏度的新标准。Vanquish Flex Quaternary 系统秉承了 Vanquish 固有的所有价值理念,如在设计上主要关注运行时间、稳健性和可靠性。多种检测选项为您提供您所需要的性能。Thermo Scientific™ Viper™ 整个系统采用手拧装配连接,便于安装。该系统是生物制药和制药应用的理想之选。 有更多溶剂通道:2x3。湖南赛默飞世尔Vanquish液相色谱系统价格
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高效液相色谱分离原理
空间排阻
(Steric Exclusion Chromatography)
空间排阻色谱法以凝胶(gel) 为固定相。它类似于分子筛的作用,但凝胶的孔径比分子筛要大得多,一般为数纳米到数百纳米。溶质在两相之间不是靠其相互作用力的不同来进行分离,而是按分子大小进行分离。分离只与凝胶的孔径分布和溶质的流动力学体积或分子大小有关。试样进入色谱柱后,随流动相在凝胶外部间隙以及孔穴旁流过。在试样中一些太大的分子不能进入胶孔而受到排阻,因此就直接通过柱子,首先在色谱图上出现,一些很小的分子可以进入所有胶孔并渗透到颗粒中,这些组分在柱上的保留值比较大,在色谱图上***出现。
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