阳离子壳交联的类Knedel纳米粒子作为转染试剂结合机制：阳离子壳交联的类Knedel纳米颗粒（cSCKs）含有不同百分比伯胺和叔胺，通过与siRNA结合来发挥作用18。含100％伯胺的cSCK在HeLa细胞中的沉默效率比较高，能够抑制人血清中siRNA降解以及转染HeLa和小鼠巨噬细胞系。与融合的GALA肽复合可以增强iNOS在较低siRNA浓度下的siRNA沉默，这被证明可以增强摄取后的内体逃逸，进一步说明其结合机制可能涉及与siRNA的紧密结合以及促进细胞内转运。作用特点：cSCK-pa100在HeLa细胞、293T细胞和人支气管上皮（HEK）细胞中显示出比Lipofectamine2000更高的沉默效率，但在人支气管上皮（BEAS-2B）细胞和人乳腺上皮（MCF10a）细胞中可比。在小鼠巨噬细胞系中，cSCK-pa100表现出更大的iNOS沉默，并提供了更好的保护免于血清降解，证明了其作为siRNA转染剂的潜在用途。综上所述，不同类型的阳离子RNA转染试剂在结合RNA分子的机制上存在差异，主要涉及静电相互作用、纳米复合物形成以及与其他分子的协同作用等方面。这些差异导致了它们在转染效率、细胞毒性、对不同细胞类型的适用性等方面的不同特点。化学转染的效率可能取决于几个因素，如使用的试剂类型、靶细胞的来源和性质，以及选择的DNA与试剂比例。福建转染试剂教做
调节免疫刺激特性鱼精蛋白稳定的RNA还可以调节免疫刺激特性。鱼精蛋白-RNA复合物可以刺激树突状细胞（DC），使其上调成熟标志物，并以剂量依赖的方式产生促炎性细胞因子1213。此外，两个DC亚群均以与IL-10有利的比率诱导T细胞增殖和IFNγ分泌1213。这表明鱼精蛋白-RNA复合物可用于离体刺激人mDC和pDC，用于免疫***环境1213。四、灵活的RNA递送系统平台鱼精蛋白作为RNA递送稳定剂，构建了一个灵活且多功能的平台。可以根据***目标进行调整，例如可以与靶向抗体融合实现精确递送，或者被消化成细胞穿透肽以提高转染效率，也可以与功能性聚合物非共价混合23。综上所述，鱼精蛋白作为RNA递送稳定剂，通过保护RNA免受降解、增强细胞穿透性、调节免疫刺激特性以及构建灵活的递送系统平台等多种机制，在RNA递送中发挥着重要作用。shRNA转染试剂教做RNA 转染试剂在不同实验环境下表现出不同的效果。
二、影响因素的差异细胞接种密度：不同类型的细胞在比较好转染效率下的细胞接种密度不同。例如，宫颈*细胞Hela和Siha的比较好接种密度为每24孔板的每孔1.5×10⁴个细胞1，而研究中Caco-2细胞的比较好接种密度为2×10⁵9。DNA用量：各种细胞所需的DNA用量也存在差异。如PC12细胞转染的比较好DNA用量为2μg3，而Caco-2细胞转染时比较好DNA用量为4μg9。脂质体与DNA的比例：不同细胞类型对应的比较好脂质体与DNA的比例不同。Hela细胞中miRNA与脂质体比例为1:0.5，Siha细胞中为1:0.71；Caco-2细胞转染时比较好脂质体与DNA比例为2.5:19。复合物形成时间和孵育时间：不同细胞类型对脂质体-DNA复合物的形成时间和细胞与复合物的孵育时间要求不同。例如，Hela和Siha细胞未明确提及复合物形成时间和孵育时间，而Caco-2细胞的比较好脂质体-DNA复合物形成时间为30min，细胞与复合物孵育时间为6h9。
阳离子树状大分子和阳离子脂质作为转染试剂结合机制：阳离子树状大分子如第五代聚酰胺酰胺树状大分子（PAMAMG5）和阳离子脂质如N-[1-(2,3-二醇油酰氧基)]-N,N,N-三甲基丙烷丙烷磺酸甲酯（DOTAP）作为转染试剂时，通过与小干扰RNA（siRNA）结合形成纳米复合物来实现转染1216。其结合过程涉及多种理化特性的相互作用，如原子力显微镜、凝胶电泳、siRNA结合和释放测定以及大小和ζ电势测量等方法可用于表征试剂-siRNA纳米复合物的理化特性。高摩尔比的DOTAP和低摩尔比的PAMAM可以比商业试剂相对更好地敲除OCT4转录，说明它们在结合RNA分子方面具有特定的优势。这种结合机制可能与它们的阳离子性质有关，能够与带负电的RNA分子通过静电相互作用结合。作用特点：在小鼠胚胎干细胞中进行评估发现，这些转染试剂对短核酸转染具有适当效率，从临床角度来看，有助于将短核酸分配到干细胞疗法中。基于病毒的转染，或者更具体地称为转导，涉及使用病毒载体将特定的核酸序列带入宿主细胞。
鱼精蛋白作为RNA递送稳定剂具有重要作用，其具体作用机制主要包括以下几个方面：一、保护RNA免受降解鱼精蛋白是一种天然阳离子肽混合物，由于其带正电荷的特性，可以与带负电荷的RNA通过相反电荷驱动耦合23。在生物系统中，RNA很容易被RNase降解，而鱼精蛋白可以与RNA复合，形成稳定的复合物，从而保护RNA免受降解1213。例如，通过将单链RNA（ssRNA）与带正电荷的蛋白鱼精蛋白复合，可以稳定阴离子RNA1213。二、增强细胞穿透性鱼精蛋白不仅可以保护RNA，还能增强RNA的穿透细胞的能力。鱼精蛋白-RNA复合物的形成具有双重功能，一方面保护RNA不被降解，另一方面增强其穿透进入细胞的能力23。这种增强的细胞穿透性可能是由于鱼精蛋白的阳离子性质，使其能够与细胞膜相互作用，促进RNA的进入细胞2。转染时推荐使用血清减少或无血清培养基包括阳离子转染试剂，如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。PEI 转染试剂定制
基因注射包括通过注射将所需的核酸物质直接输送到宿主细胞核中。福建转染试剂教做
原代细胞和干细胞的转染效率通常较低。原代细胞刚刚从组织中分离出来，还保留着体内复杂的生理特性，其细胞膜上的受体和内吞机制等可能不适应脂质体转染。例如，原代间充质干细胞的转染效率可能低于10%。干细胞由于其特殊的自我更新和分化潜能，其细胞内部的信号通路和膜运输机制对脂质体转染比较敏感，转染效率也不高。而且在转染过程中，还需要考虑不影响干细胞的干性，这也增加了转染的难度。
原代细胞和干细胞对脂质体的毒性反应比较敏感。脂质体可能会干扰它们的正常生理功能，如影响干细胞的自我更新和分化能力。对于原代细胞，可能会改变其原有的表型或者***细胞的应激反应，导致细胞提前衰老或者死亡。 福建转染试剂教做
