联合使用其他技术优化DNA和RNA转移的转染试剂在肌肉细胞中的应用：在C2C12细胞中，比较了五种商业转染试剂（Lipofectamine®3000、Viafect™、Fugene®HD、C2C12CellAvalanche®和JetOPTIMUS®）的转染效率7。通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度，所有试剂都达到了超过60%的转染效率，且对细胞生长和活力的影响有限。然而，在C2C12细胞中优化的用于DNA转移的条件下，这些试剂对siRNA的转移效率较低，并且对原代肌肉细胞的毒性较高。这提示在使用转染试剂时，可以通过联合使用其他技术或优化转染条件，以提高转染效率并降低细胞死亡。例如，可以进一步研究不同试剂之间的联合使用，或者优化转染后的培养条件，以降低细胞毒性。综上所述，在不同细胞模型中提高RNA转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡，可以通过选择合适的转染试剂、优化转染条件以及联合使用其他技术等方法来实现。未来的研究可以进一步深入探讨不同细胞模型中比较好的转染策略，以满足不同研究领域的需求。阳离子脂质体合成中常用的分子是中性脂质二油基磷脂酰乙醇胺(DOPE)。上海转染试剂性价比高
二、影响因素的差异细胞接种密度：不同类型的细胞在比较好转染效率下的细胞接种密度不同。例如，宫颈*细胞Hela和Siha的比较好接种密度为每24孔板的每孔1.5×10⁴个细胞1，而研究中Caco-2细胞的比较好接种密度为2×10⁵9。DNA用量：各种细胞所需的DNA用量也存在差异。如PC12细胞转染的比较好DNA用量为2μg3，而Caco-2细胞转染时比较好DNA用量为4μg9。脂质体与DNA的比例：不同细胞类型对应的比较好脂质体与DNA的比例不同。Hela细胞中miRNA与脂质体比例为1:0.5，Siha细胞中为1:0.71；Caco-2细胞转染时比较好脂质体与DNA比例为2.5:19。复合物形成时间和孵育时间：不同细胞类型对脂质体-DNA复合物的形成时间和细胞与复合物的孵育时间要求不同。例如，Hela和Siha细胞未明确提及复合物形成时间和孵育时间，而Caco-2细胞的比较好脂质体-DNA复合物形成时间为30min，细胞与复合物孵育时间为6h9。郑州转染试剂代做脂质复合物又称阳离子脂质-核酸复合物(CLNACs)。
诱导交替剪接和恢复功能蛋白：某些转染试剂在将RNA导入细胞后，可诱导特定的生物学效应。例如，2'-OMeUtaPS介导的转染，在HeLapLuc705细胞中，转染的反义PMO序列诱导了编码萤光素酶的前mRNA的外显子23的交替剪接，恢复功能性萤光素酶的生产，而不会损害细胞毒性5。在肌营养不良症mdx小鼠模型的肌管肌肉细胞中，靶向聚A尾PMO序列针对编码肌营养不良蛋白的前mRNA的剪接位点，触发交替剪接事件，导致突变外显子（外显子23）从pre-mRNA中切除并产生功能性肌营养不良蛋白2。提高转染效率和减少细胞死亡：为了优化并促进将病毒RNA导入哺乳动物细胞，研究人员比较了不同的市售RNA转染试剂将黄热病病毒（YFV）和丙型肝炎病毒（HCV）RNA复制子递送至Huh7细胞的能力，并与电穿孔进行比较。结果发现，如果适当优化，某些试剂将优于电穿孔，细胞死亡少得多，RNA需求少，转染效率提高3。
对细胞周期的影响：在微小RNA-1180转染肾*细胞的实验中，FCM结果显示，转染miR-1180后，位于G0/G1期的细胞比例明显增大，而位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降，表明细胞周期被阻滞在G0/G1期1。对转染效率的影响：在脂质体介导RNA干扰质粒转染鸡成骨细胞条件的优化实验中，对转染前细胞融合度、质粒质量与脂质体体积比及转染时间进行优化，在荧光倒置显微镜下观察并计算转染效率。结果表明，在转染前细胞融合达到90％以上，质粒DNA与脂质体比例为1:2.5时转染效率比较高，并且在转染后48h转染效果比较好3。在筛选更优的脂质体转染试剂的实验中，分别用RNAiMax及MessageMax将modGFP转染入MEF细胞，流式分析发现MessageMax的转染效率为（83.33%±3.23%），略高于RNAiMax的（78.77%±6.12%），两者没有统计学差异，但是流式分析和荧光显微镜观察均表明MessageMax转染后1周内的蛋白翻译表达效率更高，是更高效的modRNA转染试剂8。
RNA 转染试剂的效果受到多种因素的影响，包括细胞类型、转染试剂种类、转染条件等。在实际应用中，需要根据具体的实验需求选择合适的转染试剂和优化转染条件，以提高转染效率并减少对细胞的毒性作用。 化学转染的效率可能取决于几个因素，如使用的试剂类型、靶细胞的来源和性质，以及选择的DNA与试剂比例。
优化转染条件MOI值对Lentivirus载体转染许旺细胞的影响：以Lentivirus三质粒系统构建病毒载体，在体外对原代大鼠许旺细胞进行转染，研究不同MOI值（***复数）对转染效率的影响32。结果显示，在病毒转染3天后，各不同MOI值的培养孔中开始出现少量荧光反应，第5天时荧光数量明显增多，第7天达到高峰，第9天与第7天变化不明显。从细胞转染效率来看，不同的MOI值效果不同，MOI值为5和10时转染效率较高。这表明在使用Lentivirus载体转染许旺细胞时，优化MOI值可以提高转染效率。同时，未提及该转染过程对细胞死亡的影响，但可以通过进一步的实验，如细胞活性检测等，来确定在提高转染效率的同时对细胞死亡的影响。基因是阳离子聚合物作为转染剂的主要应用。阳离子转染试剂靠谱
人类原代干细胞是另一种公认的难以转染的细胞类型，转染这种细胞类型的挑战仍然是效率低和细胞活力低。上海转染试剂性价比高
原代细胞和干细胞的转染效率通常较低。原代细胞刚刚从组织中分离出来，还保留着体内复杂的生理特性，其细胞膜上的受体和内吞机制等可能不适应脂质体转染。例如，原代间充质干细胞的转染效率可能低于10%。干细胞由于其特殊的自我更新和分化潜能，其细胞内部的信号通路和膜运输机制对脂质体转染比较敏感，转染效率也不高。而且在转染过程中，还需要考虑不影响干细胞的干性，这也增加了转染的难度。
原代细胞和干细胞对脂质体的毒性反应比较敏感。脂质体可能会干扰它们的正常生理功能，如影响干细胞的自我更新和分化能力。对于原代细胞，可能会改变其原有的表型或者***细胞的应激反应，导致细胞提前衰老或者死亡。 上海转染试剂性价比高
