基于斑马鱼模型实验,可进行活性化合物发现、高通量药物筛选、药效评价、安全性评价、生物学质量控制等临床前研究,实验周期短、成本低,结果直观,助力医药企业的药物研发、品控及宣传推广。利用斑马鱼模型评价氧化应激。斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。当生物暴露在环境污染物中,生物可能会发生氧化应激,主要表现为活性氧(ROS)产生和消耗的不平衡。在需氧生物的活细胞中,活性氧被一种由水和脂溶性低分子量自由基清除剂、特异性抗氧化酶组成的抗氧化防御机制解。应用ROS特异性荧光检测试剂,它的水解产物能被ROS氧化为高荧光物质,用多功能酶标仪检测荧光值反映氧化应激的程度。本方法已被授予国家发明专利。斑马鱼模型评价肾脏毒***物研究实验

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是底物对照组、正常对照和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内),并加入ROS特异性荧光检测试剂。服用供试品一段时间后,我们使用酶标仪对斑马鱼体内ROS进行荧光定量。可以看到,服用供试品组斑马鱼体内荧光值比正常对照组有明显升高。1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组的斑马鱼ROS水平明显高于正常对照组,与正常对照组存在明显性差异。2.本实验证实了该供试品诱发斑马鱼氧化应激。药物安全性检测评价疏肝解酒酒精性脂肪肝防治功效。

贫血是指人体外周血红细胞容量减少,低于正常范围下限的一种常见的临床症状。溶血性贫血是由于红细胞的破坏增速、增多,超过造血补偿能力范围时所发生的一种贫血。斑马鱼造血系统的形成,包括红系、髓系、淋系及巨核系为主的造血系统,其相关的转录因子及信号转导通路同人类有高度的同源性,这些特点使斑马鱼在人类造血系统和血液疾病的研究中有着更加大量的应用。研究表明,苯肼是一种溶血剂。苯肼作用于红细胞膜,加速膜表面亮氨酸、赖氨酸及组氨酸的水解,使大量红细胞迅速遭到破坏;同时可选择性地氧化膜骨架和α珠蛋白,并将磷脂酰丝氨酸易位至红细胞表面,导致红细胞变形性降低,增强红细胞黏附到细胞外基质的能力从而破坏循环血中的成熟红细胞,使血红蛋白变性聚集、形成Heinz小体,使得红细胞的破坏速度远大于机体红细胞再造的能力,导致机体发生溶血性贫血。用邻联茴香胺染色法对红细胞进行特异性染色(呈红色),贫血斑马鱼心脏部位的红细胞较正常斑马鱼明显减少。由于斑马鱼早期出现血液循环时胚胎透明,在解剖显微镜下可以观察到。
利用斑马鱼模型评价保护肾脏功效。肾脏是人体的重要组成部分,,发挥着从血液中滤过代谢废物并维持体内正常酸碱和渗透压平衡的重要作用。斑马鱼的肾脏与哺乳动物肾脏的发育及疾病的发生、发展存在很多相似之处,涉及的许多基因具有高度保守性。因此,斑马鱼适合用于评价保护肾脏功效。马兜铃酸主要损伤肾小管上皮细胞,导致肾间质纤维化及肾萎缩,并出现低分子蛋白尿、严重贫血症状,被称为“马兜铃酸肾病”。在人体和斑马鱼上,马兜铃酸均可诱发肾性水肿和肾脏形态功能异常,引起不可逆性肾损伤并至死亡。评价保护肾脏功效有两个指标:1.肾性水肿发生率。由于斑马鱼通体透明,肾性水肿可以明显的被观察到。2.肾小球滤过率。通过注射荧光物质,正常斑马鱼可将荧光物质排出体外,肾小球滤过功能损伤的斑马鱼不能将荧光物质排出体外。观察斑马鱼全身荧光强度可分析肾小球滤过率。关于药物安全性的评价。

斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能,包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。斑马鱼对典型的心脏的药理学反应与人类相似。斑马鱼受精后48h,心血管系统功能全,呈现出例子通道和代谢过程的复杂性。因此,可以应用斑马鱼评价药物对心衰的防治作用。维拉帕米是苯烷胺类钙离子拮抗剂,其诱导心力衰竭的药理学基础有以下三方面:(1)对心脏的抑制作用,即负性频率、负性传导及负性肌力作用,且为剂量依赖性;(2)扩张血管作用,即对外周血管具有明显的扩张作用,使外周阻力降低,平均动脉压下降;(3)减少冠脉血流,降低心肌血供。我们用维拉帕米建立斑马鱼心衰模型。患有心衰的斑马鱼与正常斑马鱼比较,出现心包水肿、静脉瘀血、心搏出量减少和血流速度减慢,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。利用斑马鱼模型评价帕金森病防治作用。药物药效试验费用
斑马鱼评价胃肠道粘膜损伤辅助保护功效。药物研究实验
我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和服用肝保护剂组。其中正常对照组未摄入乙醇,模型对照组与服用肝保护剂组都摄入了等量的乙醇(乙醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。肝保护剂组在摄入对乙醇的同时摄入美他多辛之类的肝保护剂。服用一段时间肝保护剂后,我们在显微镜下观察斑马鱼肝脏及卵黄囊表型,同时制作成病理切片观察肝脏的病理结构变化。从病理切片中也能看出来,正常对照组肝细胞核规则清晰,肝细胞结构正常,边缘清晰。乙醇处理后,斑马鱼肝细胞结构模糊、肝细胞核肿大,肝组织出现脂肪空泡样变性,而肝保护剂组细胞和正常斑马鱼中形态相似。药物研究实验
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