细胞色素P450酶是许多同工酶组成的超大家族,主要位于肝脏微粒体中,参与生物体许多内源性和外源性物质的生物转化。许多临床相关药物间的相互作用与抑制和/或诱导CYP酶有关,改变CYP酶的活性对药效有重要影响,有时甚至会威胁生命。在众多肝脏细胞色素P450酶家族中,CYP3A4和CYP2D6与70%以上的药物代谢有关,其中CYP3A4占50%以上,而CYP2D6占20%左右,因此目前药物代谢研究集中于评价药物对CYP3A4和CYP2D6的影响。我们评价斑马鱼对细胞色素P450的影响作用有2个指标:1.对CYP3A4的影响作用;2.对CYP2D6的影响作用。评价疏肝解酒酒精性脂肪肝防治功效。药物功效的研究

斑马鱼和哺乳动物的心脏有相似的功能,包括血流方向、由专门的心内膜肌肉组织驱动的高压系统、由电子系统调节的心律以及与起搏活动相关的心跳。斑马鱼对典型的心脏的药理学反应与人类相似。斑马鱼受精后48h,心血管系统功能全,呈现出例子通道和代谢过程的复杂性。因此,可以应用斑马鱼评价药物对心衰的防治作用。维拉帕米是苯烷胺类钙离子拮抗剂,其诱导心力衰竭的药理学基础有以下三方面:(1)对心脏的抑制作用,即负性频率、负性传导及负性肌力作用,且为剂量依赖性;(2)扩张血管作用,即对外周血管具有明显的扩张作用,使外周阻力降低,平均动脉压下降;(3)减少冠脉血流,降低心肌血供。我们用维拉帕米建立斑马鱼心衰模型。患有心衰的斑马鱼与正常斑马鱼比较,出现心包水肿、静脉瘀血、心搏出量减少和血流速度减慢,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。中西药联用的安全性评价利用斑马鱼模型评价对细胞色素P450的影响。

斑马鱼消化道的解剖结构和细胞结构与人类消化道相似,具有同心圆层的内上皮、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。三硝基苯磺酸(TNBS)的乙醇溶液造模法属于正常免疫系统下的半抗原诱导性模型,当TNBS的乙醇溶液灌肠时,乙醇作为有机溶剂溶解肠粘膜表面的黏液,暂时性破坏肠粘膜屏障,使TNBS和肠组织蛋白结合形成完全抗原,导致肠黏膜免疫系统针对该抗原的迟发性变化反应,并造成肠黏膜的损伤。杯状细胞是黏蛋白的主要来源,其数量和形态反应肠粘膜的健康状况,是肠粘膜异常的敏感指标。由于斑马鱼通体透明的特点,有两种方法检测结肠炎的防治作用。1.观察肠腔面积的变化,2.通过特异性染料(呈蓝色)对肠道的杯状细胞染色,通过观察杯状细胞数量来判断肠粘膜的损伤情况。
药物的临床疗效一般通过疗效观测指标来记录,而疗效评价可以是某一疗效观测指标的直接测量结果,更多的是在直接测量结果基础上转化而来的、特定的评价指标来评价。同一疗效观测指标,可以转化出多种疗效评价指标,不同的疗效评价指标在药物有效性确证中的作用不同和地位不同,有的可以作为主要疗效指标,有的则作为次要疗效指标。如某一适应证的评价量表,以前后的减分值为主要疗效指标,而以50%的减分率的患者比例为次要疗效指标。而另一适应证的评价量表,以积分变化到某一积分值以下患者的比例为主要疗效指标,而前后的减分值比较为次要疗效指标。药物临床前研究实验。

我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和肾保护剂组。其中正常对照组未摄入马兜铃酸,模型对照组和肾保护剂组都摄入了等量的马兜铃酸(马兜铃酸通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。肾保护剂组在摄入马兜铃酸的同时摄入山牡荆水提取物之类的肾保护剂。检测肾小球滤过率的斑马鱼在实验过程中需额外静脉注射荧光物质。服用一段时间肾保护剂后,1.统计斑马鱼肾性水肿的发生率,2.用荧光显微镜拍照,通过斑马鱼全身荧光强度分析肾小球滤过率。斑马鱼模型评价基因毒性。生物学质量控制
利用斑马鱼模型实验评价降糖功效。药物功效的研究
斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87%,斑马鱼肝脏中有许多与哺乳动物同源的脂质代谢酶,与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当,包括酶的诱导和氧化应激。而且斑马鱼幼鱼通体透明,容易观察到毒性表型。酒精性肝损伤是全世界发病率和死亡率的主要原因,酒精性肝损伤是过量饮酒的结果。当患者继续饮酒时,会诱发严重的肝损伤形式,如脂肪性肝炎,纤维化,肝硬化和肝细胞。用乙醇可以诱发斑马鱼肝脏损伤,模拟人的肝脏疾病。我们评价斑马鱼肝脏毒性有4个指标:1.肝脏面积;2.肝脏变性程度;3.卵黄囊吸收延迟的发生率(卵黄囊是脂肪,卵黄囊吸收与肝功能密切相关);4.肝脏病理切片。药物功效的研究
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